傳統(tǒng)蛋白分析的Western實(shí)驗(yàn)技術(shù),通過電泳區(qū)分不同的組分,并轉(zhuǎn)移至固相支持物,通過特異性試劑(抗體)作為探針,對靶物質(zhì)進(jìn)行檢測,蛋白質(zhì)的Western印跡技術(shù)結(jié)合了凝膠電泳的高分辨率和固相**測定的特異敏感等多種特點(diǎn),可檢測到低至1~5ng(*低可到10-100pg)中等大小的靶蛋白。
由于操作步驟多,操作繁瑣,每一步的失誤都會(huì)造成全盤失敗,從而重復(fù)實(shí)驗(yàn),對于珍貴樣品,更是要倍加小心。另外,試驗(yàn)流程長,結(jié)果重復(fù)性差,要達(dá)到好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,成本也會(huì)很高。
因此,自從它誕生30多年來,如何使實(shí)驗(yàn)簡單化(Simple)一直是技術(shù)發(fā)展的瓶頸,科學(xué)家們一直在尋找一種革新的技術(shù)來克服Western傳統(tǒng)技術(shù)的不足,發(fā)揚(yáng)它的優(yōu)勢,直到2011年底,專門從事蛋白質(zhì)分析研究技術(shù)的美國ProteinSimple公司(原有名的ALPHA INNOTCHE公司)經(jīng)過多年開發(fā),在全球推出****的*新蛋白分析專家——全自動(dòng)Western Blot分析系統(tǒng)Simon,從而使Western實(shí)驗(yàn)變得簡單,高效。該系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)在同一根樣品管中,從400nL樣品中分離、捕獲、固定蛋白質(zhì),繼而進(jìn)行后續(xù)的**檢測分析。自動(dòng)運(yùn)行加樣、分離、固定蛋白、**檢測和化學(xué)發(fā)光檢測,無需人工干預(yù)。
Simon采用革新的技術(shù)顛覆傳統(tǒng)Western Blot分析,實(shí)現(xiàn)在同一根樣品管中,從400nL樣品中分離、捕獲、固定蛋白質(zhì),繼而進(jìn)行后續(xù)的**檢測分析。
Simon系統(tǒng)采用12根長5cm,內(nèi)徑100um的微量樣品管,結(jié)合**的內(nèi)涂布技術(shù),可以實(shí)現(xiàn)在同一根樣品管中,從400nL樣品中分離、捕獲、固定蛋白質(zhì),繼而進(jìn)行后續(xù)的**檢測分析。該系統(tǒng)可同時(shí)分析盛放于一塊酶標(biāo)板上的12個(gè)細(xì)胞裂解樣品,與樣品相應(yīng)的抗體也置于同一塊酶標(biāo)板上。**分析采用化學(xué)發(fā)光法檢測和定量目標(biāo)蛋白。軟件設(shè)計(jì)獨(dú)特,用戶可定義樣品,選擇檢測方法,自動(dòng)運(yùn)行加樣、分離、固定蛋白、**檢測和化學(xué)發(fā)光檢測,無需人工干預(yù)(更多信息請登錄www.foundxy.cn)。目前,還沒有其他任何一種技術(shù)能夠做到用如此微量的樣品同時(shí)進(jìn)行物理分離和**分析檢測。
主要技術(shù)和性能規(guī)格要求
1、可自動(dòng)進(jìn)行各種蛋白質(zhì)樣品分離、**檢測,定性和定量分析,廣泛應(yīng)用于:蛋白質(zhì)性質(zhì)鑒定、蛋白質(zhì)定量分析、蛋白質(zhì)功能研究、蛋白質(zhì)修飾和差異表達(dá)研究、抗體研究等多個(gè)領(lǐng)域
2、全自動(dòng)Western Blot分析
3、系統(tǒng)自動(dòng)加樣,避免實(shí)驗(yàn)過程中的人為誤差
4、根據(jù)分子量大小自動(dòng)進(jìn)行蛋白質(zhì)分離
5、無需繁瑣、混亂的制膠、跑膠過程,減少操作程序,避免污染
6、無需轉(zhuǎn)膜,減少實(shí)驗(yàn)步驟,避免樣品損失,提高結(jié)果的準(zhǔn)確率和重復(fù)率
7、采用**技術(shù)進(jìn)行蛋白質(zhì)捕獲及固定
8、系統(tǒng)自動(dòng)進(jìn)行一抗、二抗孵育,自動(dòng)進(jìn)行**和化學(xué)發(fā)光檢測步驟
9、系統(tǒng)自動(dòng)完成數(shù)據(jù)采集過程
10、軟件設(shè)計(jì)獨(dú)特,客戶可定義樣品,設(shè)置檢驗(yàn)流程和分析運(yùn)行數(shù)據(jù)
11、軟件可對結(jié)果自動(dòng)進(jìn)行**的定量分析
12、一次可運(yùn)行1~12個(gè)獨(dú)立樣品
13、單個(gè)樣品上樣量為~5ug
14、單個(gè)樣品上樣體積~5ul
15、反應(yīng)管體積400nl
16、一次運(yùn)行時(shí)間3-5個(gè)小時(shí)
17、靈敏度:ng級
18、動(dòng)態(tài)范圍:3 logs
19、結(jié)果具有高度重復(fù)性,CV≤10%
20、可置于工作臺(tái)面上,方便操作
*新蛋白分析專家——全自動(dòng)Western Blot分析系統(tǒng)Simon,采用革新的Simple Western技術(shù)徹底顛覆了傳統(tǒng),它利用的微量樣品管定位及分析技術(shù),結(jié)合化學(xué)發(fā)光檢測原理進(jìn)行納米級的自動(dòng)化實(shí)驗(yàn),避免了人為操作誤差,有效提高檢測結(jié)果的**性和重復(fù)性。